2× KOD PCR Master Mix (含染料)

2× KOD PCR Master Mix(含染料)

目錄號(hào):71517

產(chǎn)品內(nèi)容

保存條件

-20℃保存，有效期 2 年。經(jīng)常使用，可置于 4 °C 保存，有效期 3 個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

本產(chǎn)品包含KOD DNA Polymerase、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液，濃度為2×。該酶所具有的chao強(qiáng)3’→ 5’外切酶活性使得其保真性比Pfu DNA Polymerase 更高，保真性是Taq DNA Polymerase的80倍，同時(shí)具有合成速度快的特點(diǎn)，聚合速度約為普通Pfu DNA Polymerase的5倍，Taq DNAPolymerase的2倍，達(dá)到100-138bp/秒，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得高產(chǎn)量的擴(kuò)增產(chǎn)物，特別適合于高保真地?cái)U(kuò)增6kb以?xún)?nèi)的PCR 產(chǎn)物，擴(kuò)增所得的DNA為平末端，可用于基因克隆、表達(dá)及突變分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

KOD擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為平末端（Blunt），可直接用于Blunt載體克?。–at#V116、V117）

本產(chǎn)品含紅色示蹤染料，不需添加上樣緩沖液即可直接上樣進(jìn)行電泳；也可經(jīng)過(guò)純化處理，以用于酶切、連接、測(cè)序等后續(xù)操作。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 高產(chǎn)：產(chǎn)量是普通 Taq 酶的 2 倍！

2. 高效：延伸速度 100-138bp/sec！

3. 高成功率：對(duì)于高 GC 模板和特殊結(jié)構(gòu)的復(fù)雜模板有良好效果！

2 × KOD PCR Master Mix 使用說(shuō)明：

一、配制 PCR 反應(yīng)體系：(于冰上配制)

參考模板用量：（以 50 μl 反應(yīng)體系為例）

質(zhì)粒：0.1-10 ng；

細(xì)菌基因組：10-100 ng；

人類(lèi)基因組：50-150 ng；

cDNA：1-5 μl from RT。

注意：用 ddH2O 補(bǔ)足反應(yīng)體系（體積）至 50 μl。實(shí)際操作中，首先要計(jì)算好需要補(bǔ)加 ddH2O 的量以后，建議先加水，然后按上述順序添加其它成分，最后添加 KOD DNA Polymerase。充分混勻后，離心數(shù)秒使反應(yīng)混合物沉到管底，然后將反應(yīng)管置于 PCR 儀中進(jìn)行擴(kuò)增。

二、設(shè)置 PCR 循環(huán)條件：（請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)調(diào)整）

注意：一般情況下，Annealing Temperature = Tm - 5°C

如果擴(kuò)增片段小于 4 kb，建議 KOD 酶的延伸速度為 1kb / 15 sec；

如果擴(kuò)增片段大于 4 kb，建議延伸速度為 1kb / 20-30 sec。

三、結(jié)果檢測(cè)：反應(yīng)結(jié)束后取 5 µl 反應(yīng)產(chǎn)物，瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。

2× KOD PCR Master Mix(含染料)