植物總 RNA 提取試劑盒

FlashPure Plant Total RNA Mini Kit

植物總RNA提取試劑盒

目錄號(hào)：91019

產(chǎn)品內(nèi)容

保存溫度

室溫（15 ~ 25℃）保存，有效期 12 個(gè)月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

適用于提取絕大多數(shù)植物根、莖、葉、花的總RNA，RNA可直接用于RT， RT-PCR，RT-qPCR，RACE，普通轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等。

本試劑盒是同類(lèi)產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛，不但可以提取小麥、玉米、水稻、大豆、番茄、煙草、擬南芥等簡(jiǎn)單植物，也可以提取茶樹(shù)葉片、棉花葉片、葡萄葉片、楊樹(shù)葉片、番薯葉片、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。

如果遇到果實(shí)、種子、中草藥，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）、葡萄果實(shí)、藍(lán)莓果實(shí)、百合鱗莖、土豆塊莖；或者次級(jí)代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物，請(qǐng)選擇R513-果實(shí)種子總RNA提取試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. 無(wú)毒：免lv仿、免β-巰基乙chun！

2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全過(guò)程僅需 20 分鐘！

注意事項(xiàng)

a. 自備試劑：無(wú)水乙chun。

b. 提取過(guò)程使用 RNase-Free 的吸頭；研缽用水che底洗凈，烘箱烘干即可；

c. 樣品加入裂解液 PRL 勻漿后，可在–80℃保存一個(gè)月以上。

d. 取 RNA 樣本時(shí)，把新鮮組織樣本浸入 RNAsafe ( RNA 樣品保存液， 91115-100 ) 中，可在 37℃保存一天，在 25℃保存一周，在 4℃保存一個(gè)月，在-20℃或者–80℃長(zhǎng)期保存。

操作步驟

提示：所有離心步驟必須在室溫（15 ~37℃）下進(jìn)行。

第一次使用前，請(qǐng)先在漂洗液 RW 中加入無(wú)水乙chun，加入體積詳見(jiàn)標(biāo)簽

1. 材料處理：

a．取 500 μl 裂解液 PRL，轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管中，再加入 50 μl 糖酚去除劑 PAD，混勻備用。

注意：對(duì)于幼嫩的農(nóng)作物葉片等簡(jiǎn)單樣本，不加糖酚去除劑 PAD，RNA

的產(chǎn)量可能會(huì)提高一些。

b．液氮中研磨適量植物組織成細(xì)粉，取≤50 mg 細(xì)粉轉(zhuǎn)入上述裝有裂解

液 PRL 的 1.5 ml 離心管中,劇烈渦旋震蕩 30 sec，充分混勻。

（冬天氣溫低，37℃搖床振蕩 3 min，可增強(qiáng)裂解效果，提高產(chǎn)量）

c． 將裂解物 13,000 rpm 離心 5-10 分鐘，沉淀不能裂解的碎片。

注意：使用 1 ml 的裂解液 PRL 和 100 μl 糖酚去除劑去裂解 100 mg 樣品，RNA 產(chǎn)量會(huì)翻倍。

2. 小心吸取上清（一般 480 μl，注意不要吸到沉淀）轉(zhuǎn)入一個(gè)新的離心管中，加入 0.5 倍上清體積的無(wú)水乙chun（例如：480 μl 上清，加入 240 μl無(wú)水乙chun），此時(shí)可能出來(lái)沉淀，用移液器吹打混勻，不需要離心。

3. 轉(zhuǎn)移上清混合液至 RNA 吸附柱中，13,000 rpm 離心 2 min，倒棄濾液。

注：吸附柱的容積為 750 μl，如果混合液超過(guò)此體積，請(qǐng)分兩次上柱。

4. 加入700 μl 去蛋白液RW1，室溫放置1min , 13,000 rpm離心30 sec，倒棄濾液。

5. 加入 500 μl 漂洗液 RW, 13,000 rpm 離心 30 sec，倒棄濾液。

6. 重復(fù)步驟 5。

7. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中，13,000 rpm 離心 2 min，除去吸附膜上殘留的乙chun。

8. 取出 RNA 吸附柱，放入 1.5 ml RNase-free 離心管中，向 RNA 吸附膜的中央懸空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O，室溫放置 1 min，13,000 rpm 離心 1 min。

9. 提取的 RNA 可直接用于下游實(shí)驗(yàn)，或于-70℃保存，避免 RNA 降解。

附錄：

一、免液氮直接研磨（自動(dòng)研磨儀）——適用于新鮮樣本

a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm兩粒，加600μl裂解液 ARL，

放進(jìn)20 mg左右的樣本，設(shè)置65個(gè)頻率，震蕩2 min。

b. 將裂解物13,000 rpm 離心3 min，沉淀不能裂解的碎片。

二、液氮研磨（自動(dòng)研磨儀）:

a. 把研磨模塊丟到液氮中預(yù)冷，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。

b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 鋼珠3粒，放進(jìn)20-30mg樣本，投入液氮中預(yù)冷。

c. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中，放進(jìn)研磨儀，設(shè)置 55 個(gè)頻率， 震蕩 30~60 sec。（以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例）

d. 研磨完成后，馬上加600μl裂解液ARL，劇烈渦旋振蕩,充分混勻。

e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min，沉淀不能裂解的碎片。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

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