諾博萊德 IEF考馬斯亮藍(lán)染色液

IEF考馬斯亮藍(lán)染色液   凝膠染色

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍(lán) R250 為染料可用于 SDS-PAGE 或非變性 PAGE 等蛋白電泳膠的常規(guī)染色或 Western 轉(zhuǎn)膜后 PAGE 膠上殘余蛋白的檢測(cè)。

等點(diǎn)聚焦染色后考馬斯亮藍(lán)染色又稱 IEF 考馬斯亮藍(lán)染色，一般與三lv乙酸溶液及脫色液 聯(lián)合使用。本染色液經(jīng)過(guò)改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性氣味的乙酸。

用途：IEF蛋白電泳膠的染色

自備材料：

1、20%三lv乙酸水溶液

2、水平或側(cè)擺搖床

3、蒸餾水

4、20%甘油水溶液

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)

操作步驟(僅供參考)：

1、臨用前，取適量的考馬斯亮藍(lán)染色液和硫酸銅溶液，按 99:1 的比例混合，即為 IEF 考 馬斯亮藍(lán)染色液，即配即用。

2、等點(diǎn)聚焦電泳結(jié)束后，取凝膠放入 5-10 倍體積的 20%三lv乙酸水溶液，置于水平或側(cè) 擺搖床上緩慢搖動(dòng) 30-60min。

3、傾去 20%三lv乙酸水溶液，加入 10 倍體積的 30%甲醇水溶液(含 10%醇)，置于水 平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng) 15-20min。

4、傾去 30%甲醇水溶液(含 10%乙醇)，加入新鮮配制的 IEF 考馬斯亮藍(lán)染色液，置于水 平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng) 20min 以上(膠厚度小于等于 1mm)或 1h 以上(膠厚度大于 1mm)。

5、傾去染色液，用蒸餾水沖洗。

6、加入適量常規(guī)脫色液，確保脫色液可以充分覆蓋凝膠；推薦常規(guī)脫色液的配方是：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸餾水。

7、置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng)，室溫脫色 4～24h，期間更換脫色液 2～4 次，直至藍(lán) 色背景基本上全部被脫去，并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期，通常蛋白條帶在脫色 1～2h 后即可出現(xiàn)。

8、完成脫色后把凝膠保存在水中，用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如 需避免溶漲，可以把膠保存在含 20%甘油水溶液中，長(zhǎng)期保存可以制備干膠

注意事項(xiàng)：

1、染色時(shí)如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱，可以大大加快染色速度。但 加熱時(shí)宜盡量避免沸騰，以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂。

2、脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙，可以使部分染料吸附在吸水紙上，加快脫色； 脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

3、如果希望染色的背景更低，希望獲得更加清晰的蛋白條帶，可以加入適量的室溫蒸餾水 進(jìn)行洗滌。通過(guò)蒸餾水洗滌可以進(jìn)一步降低背景。在 4℃蒸餾水中浸泡過(guò)夜可以獲得背景更 低，條帶更清晰的條帶。在次日對(duì) 4℃蒸餾水浸泡過(guò)夜的已經(jīng)進(jìn)行了染色的凝膠再同前一天 一樣進(jìn)行染色和洗滌可以進(jìn)一步改善染色效果，獲得更好的考染蛋白條帶。

4、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

IEF考馬斯亮藍(lán)染色液   凝膠染色

產(chǎn)品訂購(gòu)信息：

P2840 IEF考馬斯亮藍(lán)染色液 100ml / 500ml