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植酸酶(phytase)試劑盒 其他系列
簡(jiǎn)要描述:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
植酸酶(phytase)試劑盒 其他系列

  • 產(chǎn)品型號(hào):BP6027
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2025-07-18
  • 訪  問  量:202
詳情介紹


植酸酶(phytase試劑盒說明書

分光光度法 50 /24 

 

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義:

植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。

測(cè)定原理:

植酸酶在一定溫度和pH 值條件下,水解底物植酸鈉生成無機(jī)磷與肌醇衍生物,無機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在 700nm 處有特征吸收峰,根據(jù) 700nm 處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性。


植酸酶(phytase)試劑盒   其他系列

試劑組成和配制:

產(chǎn)品名稱

BP6027-50T/24S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

緩沖液:堿性提取液

25ml

4℃

試劑一:粉劑

1

4℃

試劑二:液體

25ml

4℃

顯色劑:粉劑

6

4℃

說明書

一份

 

試劑一:粉劑×1 瓶,4℃保存,臨用前加緩沖液 10ml 配制,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑 4℃保存一個(gè)月。顯色劑:粉劑×6 瓶,4℃保存,臨用前根據(jù)用量每瓶加 1ml 雙蒸水溶解,再加 4ml 試劑二混勻。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)


需自備儀器和用品:

天平、低溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,超聲溶解器,回旋式振蕩器。

樣本理:

1. 酶制劑:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml) 1500~1000 的比例(建議稱取約 0.001g,加入 1ml提取液)加入提取液,在超聲波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振蕩器振蕩 15min,待測(cè)。

2. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,在超聲波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振蕩器振蕩 15min4℃,4000g 離心 10min,取上清待測(cè)。

3. 飼料樣品:飼料烘干粉碎,過 40 目篩,按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml) 15~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 提取液)進(jìn)行冰浴勻漿,在超聲波溶解器上溶解 15min,再用回旋式振蕩器振蕩 15min,4℃,4000g 離心 10min,取上清待測(cè)。

4. 培養(yǎng)液等液體樣品,混勻直接測(cè)定。

測(cè)定步驟:

 

試劑名稱(µl)

對(duì)照管

測(cè)定管

樣本µl

100

100

37℃溫育 5min

緩沖液µl

400


試劑一µl


400

混勻,37℃溫育 30min,95℃,10min 終止反應(yīng),冷卻至室溫

顯色劑µl

500

500

混勻,37℃靜置 15min,10000g,室溫,離心 5min,取上清,蒸餾水調(diào)零,測(cè)定 700nm 處吸光值,

A=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

 

注意事項(xiàng)

1、顯色劑需要臨用前根據(jù)用量配制,每一瓶是 10 個(gè)樣本的用量,新配制的顯色劑若有顏色則已經(jīng)污染或者試劑過期,應(yīng)放棄使用。

2、ΔA 線性范圍為 0.01-2

酶活性計(jì)算公式:

(一)NADP+含量的計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.2764x + 0.0082,R2 = 0.9998x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μmol/ml),y 為吸光值。按照蛋白濃度計(jì)算

酶活性定義:在 37℃pH5.5 的條件下,每毫克蛋白每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放 1μmol的無機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性(μmol/min/mg prot=A-0.0082÷0.2764÷Cpr÷T =0.1206×A-0.0082÷Cpr2.按照樣本質(zhì)量計(jì)算

酶活性定義:在 37℃,pH5.5 的條件下,每克樣本每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放 1μmol的無機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性(μmol/min /g 鮮重)=A-0.0082÷0.2764÷W÷T =0.1206×A-0.0082÷W

3. 培養(yǎng)液等液體樣品

酶活性定義:在 37℃,pH5.5 的條件下,每毫升液體每分鐘從 5mmol/L 的植酸鈉溶液中釋放 1μmol的無機(jī)磷為一個(gè)酶活力單位。

植酸酶活性(μmol/min /ml=A-0.0082÷0.2764÷T =0.1206×A-0.0082

Cpr:樣本蛋白含量,mg/ml;W:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時(shí)間,30min

植酸酶(phytase)試劑盒   其他系列


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