土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)測(cè)定試劑盒說明書
微量法 100 管/48 樣
S-UE 能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。
利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N。
產(chǎn)品名稱 | BO6002-100T/48S | Storage |
試劑一:甲苯 | 2ml(自備) | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | -4℃ |
試劑三:液體 | 22ml | 4℃ |
試劑四:A 液 | 1 支 | 4℃ |
試劑四:B 液 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑五:液體 | 2ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,臨用前加入 9ml 蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑 4℃保存;試劑四A 液:液體×1 支,4℃保存;試劑四B 液:液體×1 瓶,4℃保存;臨用前將 A 液倒入 B 液中混合,待用;用不完的試劑 4℃保存一周。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。
新鮮土樣自然風(fēng)干或 37 度烘箱風(fēng)干,過 30~50 目篩。
1 、培養(yǎng)
測(cè)定管 | 對(duì)照管 | |||
風(fēng)干土樣(g) | 0.05 | 0.05 | ||
試劑一(μl) | 20 | 20 | ||
振蕩混勻,室溫放置 15min | ||||
試劑二(μl) | 90 | |||
蒸餾水(μl) | 90 | |||
試劑三(μl) | 190 | 190 | ||
混勻,放入 37℃水浴培養(yǎng) 24h 后,10000g 25℃離心 10min,取上清液。 |
2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸餾水)。
3、測(cè)氨量(在微量石英比色皿或 96 孔板中加入下列試劑):
測(cè)定管 | 對(duì)照管 | |
稀釋后的上清液(μl) | 80 | 80 |
試劑四(μl) | 15 | 15 |
試劑五(μl) | 15 | 15 |
充分混勻,室溫放置 20min | ||
蒸餾水(μl) | 90 | 90 |
混勻,于 578nm 處,蒸餾水調(diào)零,讀吸光值 A,計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y 為吸光值A。單位的定義:每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。
脲酶活力(μg/d/g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)
10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,1d; V 反總:反應(yīng)體系總體積:0.3ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y 為吸光值A。單位的定義:每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。
脲酶活力(μg/d /g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V 反總÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)
10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,1d; V 反總:反應(yīng)體系總體積:0.3ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。
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