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平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他
簡(jiǎn)要描述:

由Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段,如該平末端DNA片段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。
平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他

  • 產(chǎn)品型號(hào):42016
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2025-07-17
  • 訪  問(wèn)  量:214
詳情介紹

平末端DNA加A試劑盒


 平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他


目錄號(hào):42016

試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性:

組成

25次(42016-25)

50次(42016-50)

Taq DNA polymerase

25ml

50ml

10 x A-tailing buffer

25ml

50ml

dATP Mix

25ml

50ml

儲(chǔ)存:-20 ℃ 保存。


具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書的參數(shù)為準(zhǔn)


產(chǎn)品介紹:

Pfu、HiFi、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物為不帶A尾的平末端DNA片段,如該平末端DNA片段需要和T載體相連接,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能與T載體的T頭互補(bǔ)連接。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分鐘左右完成整個(gè)過(guò)程。

操作步驟:

1.    平末端PCR產(chǎn)物用PCR清潔(無(wú)非特異擴(kuò)增)或者膠回收純化(有非特異擴(kuò)增)。

2.    純化好的平末端DNA片段按以下反應(yīng)體系加A尾:

平末端DNA片段

1-7ml(不超過(guò)1mg)

dATP Mix

1ml

10 x A-tailing buffer

1ml

Taq DNA polymerase

1ml

3.   輕輕混勻后72℃保溫20-30 分鐘。

4.    加A尾的產(chǎn)物可以不需要再次清潔或者膠回收純化,取1-2ml直接用于連接反應(yīng)。


平末端DNA加A試劑盒 T4原理載體及其他


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