植物銨態(tài)氮試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
氮素是構(gòu)成生物體的一種必需元素,自然界中的氮素循環(huán)包括許多轉(zhuǎn)化作用??諝庵械牡?dú)獗还痰⑸锛爸参锱c微生物的共生體固定成氨態(tài)氮,經(jīng)過硝化微生物的作用轉(zhuǎn)化成硝態(tài)氮,后者被植物或微生物同化成有機(jī)氮化物,植物組織氨氮含量可反映植物受脅迫的程度。
α-氨基酸與水合茚三酮溶液一起加熱,經(jīng)氧化脫氨變成相應(yīng)的α-酮酸,酮酸進(jìn)一步脫羧變成醛,水合茚三酮?jiǎng)t被還原,在弱酸環(huán)境中,還原型茚三酮,氨和另一分子水合茚三酮反應(yīng), 縮合生成藍(lán)紫色物質(zhì),在 580nm 處有特征吸收峰。
產(chǎn)品名稱 | BG6018-100T/96S | Storage |
提取液:液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一:液體 | 9ml | 4℃ |
試劑二:粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
試劑三:液體 | 15ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑二:粉劑×1 瓶,4℃避光保存。臨用前加 1.5ml 蒸餾水充分溶解。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、恒溫水浴鍋。
按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g,加入 1ml 提取液)加入提取液,室溫勻漿后于 25℃,12000g 離心 10min,取上清待測(cè)。
測(cè)定操作表:
空白管 | 測(cè)定管 | |
樣本(μl) | 60 |
蒸餾水(μl) | 60 | |||
試劑一(μl) | 90 | 90 | ||
試劑二(μl) | 15 | 15 | ||
充分混勻,沸水浴 5min 后自然冷卻 10min | ||||
試劑三(μl) | 150 | 150 | ||
充分混勻,取 200μl 于微量石英比色皿/96 孔板中測(cè)定 580nm 處吸光值 A,△A=A 測(cè)定管-A 空白管 |
注意:空白管只需測(cè)定一次。
計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.1535x-0.0279,R2=0.9993
NH4+—N 含量(μg/g 鮮重)=(△A+0.0279)÷ 0.1535×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 32.9×(△A+0.0279)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.315ml;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.06ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml,
W:樣本質(zhì)量,g
b. 用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0768x-0.0279,R2=0.9993
NH4+—N 含量(μg/g 鮮重)=(△A+0.0279)÷ 0.0768×V 反總÷(W×V 樣÷V 樣總)
= 65.8×(△A+0.0279)÷W
V 反總:反應(yīng)總體積,0.315ml;V 樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.06ml;V 樣總:加入提取液體積,1ml,
W:樣本質(zhì)量,g
1. 提取好的待測(cè)液盡快測(cè)定,低溫保存不得超過 24 小時(shí)。
2. 沸水浴時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響。
3. 顯色后 20min 內(nèi)完成測(cè)定。
4.zui低檢出限為 18μg/g。
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