肌酸ji酶（Creatine Kinase, CK）測(cè)定試劑盒說明書

微量法 100 管/96 樣

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心臟、肌肉以及腦等組織中，能可逆地催化肌酸與 ATP 之間的轉(zhuǎn)磷?；?/span>應(yīng)，在能量運(yùn)轉(zhuǎn)、肌肉收縮和ATP 再生中有重要作用，是臨床診斷心腦疾病的一個(gè)重要指標(biāo)。

測(cè)定原理：

CK 催化磷酸肌酸和 ADP 生成肌酸和ATP，己糖激酶催化 ATP 與葡萄糖形成 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化 6-磷酸葡萄糖與NADP+生成NADPH，導(dǎo)致 340nm 光吸收值增加。

肌酸ji酶測(cè)定試劑盒  輔酶Ⅱ系列

組成：

 試劑一：粉劑 1 瓶，4℃避光保存，使用前加 10 蒸餾水溶解。

工作液：臨用前根據(jù)用量將試劑一和試劑二以 1:1 混合。使用前 37℃溫育 2min。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

自備儀器和用品：

天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96 孔板和蒸餾水。

粗酶液提取：

1. 組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積()為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1 提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后 10000g，4℃，離心 15min。

2. 血清樣本：直接測(cè)定。

測(cè)定步驟：

1. 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm。

2. 在 96 孔板中加入 40μl 樣本和 60μl 蒸餾水，最后加入 100μl 工作液，立即混勻，37℃下測(cè)定初始吸光值A1 與 1min 后的吸光值A2，ΔA＝A2-A1。

注意事項(xiàng)：

1. 配制好的工作液 4℃穩(wěn)定 7 天，請(qǐng)配制后盡快使用。

2. 血清的CK 不穩(wěn)定，采集樣本后盡快測(cè)定，4℃避光保存可穩(wěn)定 24h。

3. 樣品蛋白質(zhì)含量需要另外測(cè)定，可選用BCA 蛋白含量測(cè)定試劑盒進(jìn)行測(cè)定。

4. OD 值大于 0.5 可用提取液適當(dāng)稀釋樣品，并在計(jì)算公式中相應(yīng)的改變稀釋倍數(shù)。

肌酸ji酶測(cè)定試劑盒  輔酶Ⅱ系列