諾博萊德 抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 抗逆系列

產(chǎn)品貨號(hào)：BC9013

產(chǎn)品名稱：抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

中文名稱：抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

別名：抗壞血酸含量測(cè)定試劑盒 AsA Kit 抗壞血酸（AsA）含量測(cè)定試劑盒 抗壞血酸（AsA）含量測(cè)試盒

規(guī)格：100T/96S

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC9013抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit

AsA又稱維生素C。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細(xì)胞中最重要的抗氧化劑，AsA在保護(hù)葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用，也是衡量農(nóng)作物產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。

抗壞血酸氧化酶（AAO）催化AsA氧化生成DHA，通過測(cè)定AsA的氧化速率，即可計(jì)算出AsA含量。

自備儀器和用品： 研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

產(chǎn)品說明:

AsA又稱維生素c。AsA是輔酶、自由基清除劑、電子共體/受體和草酸鹽與酒石酸鹽生物合成的底物等。作為植物細(xì)胞中最重要的抗氧化劑，AsA在保護(hù)葉綠體免于氧化損傷起著舉足輕重的作用，也是衡量農(nóng)作物產(chǎn)品品質(zhì)的重要指標(biāo)之一。

抗壞血酸氧化酶(AAO)催化AsA氧化生成DHA，通過測(cè)定AsA的氧化速率，即可計(jì)算出AsA含量。

技術(shù)指標(biāo):

最di檢出限:0.7539μmol/L

線性范圍:6.25-1400 μmol/L

注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、冰、低溫離心機(jī)、微量石英比色皿/96孔UV板、可調(diào)式移液器、蒸餾水。

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g，4℃離心20min，取上清置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞:按照細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500-1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一)，冰浴超聲波破碎細(xì)胞/細(xì)菌(功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min):8000g，4℃離心20min，取上清液置冰上混勻待測(cè)。

3、血清等液體:直接測(cè)定。

二、測(cè)定步驟

1、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到265nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2、試劑二在25C水浴鍋中預(yù)熱30min以上。

3、標(biāo)準(zhǔn)管:依次在微量石英比色皿/96孔UV板中加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液、160μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于265nm測(cè)定，記錄10s和130s的吸光值A(chǔ)1和A2?！鰽標(biāo)準(zhǔn)管=A1-A2。

4、測(cè)定管:依次在微量石英比色皿/96孔UV板中加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑三，迅速混勻后于265nm測(cè)定，記錄10s和130s的吸光值A(chǔ)3和A4。AA測(cè)定管=A3-A4。

三、AsA含量計(jì)算公式

1、按蛋白濃度計(jì)算:

AsA含量(nmol/mg prot) =(C標(biāo)準(zhǔn)液xΔA測(cè)定管+ΔA標(biāo)準(zhǔn)管xV樣)+(CprxV樣)=400*ΔA測(cè)定管+ΔA標(biāo)準(zhǔn)管+Cpr

2、按樣本質(zhì)量計(jì)算:

AsA含量(nmol/g質(zhì)量)=(C標(biāo)準(zhǔn)液xΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管xV樣)+(WxV樣+V樣總)

=400xΔA測(cè)定管÷△A標(biāo)準(zhǔn)管÷W

3、按細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量計(jì)算:

AsA含量(nmol/104cell)=(C標(biāo)準(zhǔn)液xΔA測(cè)定管+ΔA標(biāo)準(zhǔn)管xV樣)+(細(xì)胞數(shù)量xV樣+V樣總)

=400xΔA測(cè)定管+△A標(biāo)準(zhǔn)管+細(xì)胞數(shù)量

4、按液體體積計(jì)算:

AsA含量(nmol/mL)=(C標(biāo)準(zhǔn)液xΔA測(cè)定管+ΔA標(biāo)準(zhǔn)管xV樣)÷V樣=400xΔA測(cè)定管÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)管

C標(biāo)準(zhǔn)液:標(biāo)準(zhǔn)液的濃度，400μmol/L=400nmol/mL:V樣總:上清液總體積，1.0mL;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積，0.02mL:Cpr:樣本蛋白濃度，mg/mL:W:樣本質(zhì)量，g;細(xì)胞/細(xì)菌數(shù)量:以104為單位計(jì)量，萬。

注意事項(xiàng):

1、試劑三和標(biāo)準(zhǔn)品現(xiàn)配現(xiàn)用，配制好的4℃保存，3天內(nèi)使用完。

2、如果樣本初始吸光值大于1.4，建議將樣本用試劑一稀釋后進(jìn)行測(cè)定。

抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 抗逆系列

產(chǎn)品訂購信息：

BC9013抗壞血酸(AsA)含量檢測(cè)試劑盒 Ascorbic Acid(AsA) Content Assay Kit 100T/96S