諾博萊德 黏蛋白染色液(溫和甲基化法)
黏蛋白染色液(溫和甲基化法) 脂類染色
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
黏液物質(zhì)染色有多種方法,如AB-PAS染色、黏液HID-AB染色、標(biāo)準(zhǔn)阿利新藍(lán)染色等。以上方法大多是利用阿利新藍(lán)(Alcian)屬于陽(yáng)離子染料可與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿爾辛藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物這一原理。
NobleRyder 黏蛋白染色液(溫和甲基化法)屬于化學(xué)修飾和阻斷法的一種,其原理是利用含酒精的堿性溶液裂解耐酶唾液酸中的O-乙酰基,O-乙酰基的去除及唾液酸側(cè)鏈羥基的形成恢復(fù)了唾液酸對(duì)PAS的反應(yīng)性。Alcian染色液pH值為2.5時(shí),組織內(nèi)的羧基電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷,與阿利新藍(lán)中的陽(yáng)離子形成鹽鍵,使帶有羧基的組織(如蛋白多糖/透明質(zhì)酸以及上皮酸性黏蛋白)染色,主要用于鑒別黏蛋白中的酸性基團(tuán)。
產(chǎn)品組成:
編號(hào) 名稱 | D7860 2×50ml | Storage |
試劑(A): 酸性甲醇溶液 | 50ml | RT |
試劑(B): Alcian染色液 | 50ml | 4℃ 避光 |
使用說(shuō)明書(shū) | 1份 |
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
自備材料:
1、 系列乙醇
2、 恒溫箱
3、 蒸餾水、去離子水
操作步驟(僅供參考):
1.兩張陽(yáng)性對(duì)照片和兩張實(shí)驗(yàn)切片均脫蠟至水。
2.將一張陽(yáng)性對(duì)照片和一張實(shí)驗(yàn)片入酸性甲醇溶液,37℃孵育4h。另外的一張陽(yáng)性對(duì)照片和一張實(shí)驗(yàn)片僅用去離子水37℃孵育4h。
3.流水沖洗5min。
4.Alcian染色液染色15~30min。
5.流水沖洗。
6.梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹(shù)膠封片。
染色結(jié)果:
未處理的硫酸黏蛋白、硫酸蛋白多糖、唾液粘蛋白、透明質(zhì)酸 | 藍(lán)色 |
處理后的切片 | 淡藍(lán)色 |
注:處理后的殘存的任何顏色都是由于存在硫酸黏蛋白和(或)硫酸蛋白多糖。
注意事項(xiàng):
1.處理時(shí)間超過(guò)4h有可能導(dǎo)致硫酸根水解。
2.需要陽(yáng)性對(duì)照片以便驗(yàn)證甲基化程序的有效性。
3.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 6個(gè)月有效。
黏蛋白染色液(溫和甲基化法) 脂類染色
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D7860 黏蛋白染色液(溫和甲基化法) 2×50ml
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