諾博萊德  Hoechst33342染色液

Hoechst33342染色液   細(xì)胞周期及凋亡染色

Hoechst33342也稱bisBenzimideH33342或HOE33342。分子式為C27H28N6O 3HCl 3H2O，分子量為615.99，CAS Number 23491-52-3。Hoechst 33342是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對細(xì)胞的毒性較低，常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst33342 也用于普通的細(xì)胞核染色、DNA 染色。

Hoechst33342的最大激収波長為346nm，最大發(fā)射波長為460nm，Hoechst33342和雙鏈DNA結(jié)合后，最大激収波長為352nm，最大収射波長為461nm。NobleRyder Hoechst33342染色液可直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

產(chǎn)品組成：

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

自備材料：

1、熒光顯微鏡

2、蒸餾水

3、微量秱液器

4、PBS 或生理鹽水

操作步驟(僅供參考)：

(一)固定的組織細(xì)胞染色

1、對于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst33342染色，如果丌需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst33342染色。對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst33342染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst33342染色液，充分混勻。

2、室溫放置 5～8min。

3、輕輕吸除Hoechst33342染色液。

4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

(二)活細(xì)胞染色

1、取96、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài)，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入適當(dāng)?shù)腍oechst33342染色液，染液必須充分覆蓋住細(xì)胞。

2、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)20～30min。

3、輕輕吸取Hoechst33342染色液。

4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

5、進(jìn)行熒光檢測

染色結(jié)果：細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。 

注意事項(xiàng)：

1、Hoechst33342染色液的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要。

2、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。

3、為減緩熒光淬滅，可以使用抗熒光淬滅封片液。

4、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。

5、Hoechst33342對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。

6、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6個(gè)月有效。

Hoechst33342染色液   細(xì)胞周期及凋亡染色

產(chǎn)品訂購信息

D0813  Hoechst33342染色液  10ml