諾博萊德 植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 氮素

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2158

產(chǎn)品名稱(chēng)：植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：50T/24S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

自備試劑：該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

中文名稱(chēng)：植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：Plant Ureides Content Assay Kit

規(guī)格：50T/24S

檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer

儲(chǔ)存條件：Store at -20℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder BC2158植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 Plant Ureides Content Assay Kit

產(chǎn)品說(shuō)明:

選育高固氮活性豆科植物品種是提高豆科植物固氮能力的一個(gè)有效途徑。豆科植物根瘤菌固氮的最初輸出產(chǎn)物主要是酰脲(尿囊su和尿囊酸)。酰脲是豆科植物一根瘤菌共生固氮中的氮代謝產(chǎn)物，是氮素貯藏和運(yùn)輸?shù)闹饕问?，在豆科植物氮代謝中起著重要作用?？赏ㄟ^(guò)測(cè)定豆科植物組織中酰脲的含量，從而評(píng)估其固氮能力。尿囊su在過(guò)酸或堿條件下水解產(chǎn)生乙醛酸，然后在苯肼和強(qiáng)酸條件下可被氧化，生成紅色絡(luò)合物，在535nm處有特殊吸收峰，據(jù)此可由吸光值計(jì)算出樣本中酰脲的含量。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、鼓風(fēng)烘箱、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍、30~50目篩、研缽、冰和蒸餾水、無(wú)水乙醇(>98%，AR)、濃鹽酸(37%，AR)和EP管。

操作步驟:

一、       樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量)

植物樣本：將供試的植物樣本在65℃的鼓風(fēng)烘箱中烘干，研磨成粉狀，過(guò)30~50目篩。按質(zhì)量(g)：提取液體積(mL)1:10~20比例(建議稱(chēng)取0.1g烘干樣本，依次加入1.0mL提取液A與1.0mL提取液B，禁止將提取液A與提取液B混勻待用)，漩渦混勻，在80C水浴鍋中萃取5min，然后3500rpm，室溫，離心15min，棄沉淀，取上清液置于冰上待測(cè)。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至535nm，蒸餾水調(diào)零。

2、將試劑六與試劑七置于冰水浴中預(yù)冷30min以上，并置于冰上待用。

3、標(biāo)準(zhǔn)液的處理:將標(biāo)準(zhǔn)品配制成100μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液后，用蒸餾水稀釋至12.5、6.25、3.125、1.5625、0.78125nmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。(備注:注意不要在此步驟直接檢測(cè)吸光值)

注意：對(duì)照管不進(jìn)行水浴加熱處理;尿囊酸測(cè)定管只需進(jìn)行第二次的沸水浴;測(cè)定管、標(biāo)準(zhǔn)管及空白管在沸水浴加熱時(shí)，EP管蓋緊并用封口膜密封，避免液體蒸發(fā)影響試驗(yàn)數(shù)據(jù)。

三、植物中酰脲含量的計(jì)算

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:

以各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為x軸，其對(duì)應(yīng)的△A標(biāo)準(zhǔn)為y軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b，將△A尿囊酸和△A酰脲分別帶入方程得到x1(nmol/mL)和x2 (nmol/mL).

2、豆科植物中酰脲含量的計(jì)算:

尿囊酸含量(nmol/g質(zhì)量)≡x?xV提取+W=2xx?+W

酰脲含量(nmol/g質(zhì)量)=x2xV提取+W=2xx2÷W

V提?。杭尤胩崛∫后w積，2.0mL:W:樣本質(zhì)量。

植物中酰脲含量檢測(cè)試劑盒 氮素

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