諾博萊德 還原型gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

還原gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒 細(xì)胞凋亡

產(chǎn)品貨號(hào)：BC9953

產(chǎn)品名稱(chēng)：還原型gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

英文名稱(chēng)：Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/96S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品別名：還原型gu胱甘肽試劑盒/GSH Kit 還原型gu胱甘肽（GSH）試劑盒/還原型gu胱甘肽（GSH）測(cè)試盒

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)

BC9953 還原型gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit是由gu氨酸(Glu)、半胱an酸(Cys)和甘an酸(Gly)組成的天然三肽，是一種含巰基(-SH)的化合物，廣泛存在于動(dòng)物組織、植物組織、微生物和酵母中。gu胱甘肽能和5,5’-二硫代-雙-(2-硝基苯甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic aeid，DTNB)反應(yīng)產(chǎn)生 2-硝基-5-巰基苯甲酸和gu胱甘肽二硫化物(GSSG)。2-硝基-5-巰基苯甲酸為黃色產(chǎn)物，在波長(zhǎng)412nm處具有最大光吸收。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀、分析天平、勻漿器/研缽·細(xì)胞超聲破碎儀、低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、微量玻璃比色皿或96孔板、冰和蒸餾水

操作步驟:

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量，具體比例可以參考文獻(xiàn))

1、組織:

按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為:5~10的比例(建議稱(chēng)取約 0.g組織，加入 ImL 試劑一)1進(jìn)行冰浴勻漿(勻漿器/研缽提前放冰上預(yù)冷)。12000g，4C離心10min，取上清液放置于4℃待測(cè)。若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80C保存(可保存3天)。

2、細(xì)菌、細(xì)胞:

按照細(xì)胞數(shù)量(10個(gè)):試劑一體積(mL)為5-10:1的比例(建議5百萬(wàn)細(xì)胞加入ImL, 試劑一)，反復(fù)凍融 2-3次(可在液氮中凍結(jié)、37℃水浴中溶解)或者冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率200w，超聲 3s,間隔10s，重復(fù) 30次)，12000g，4C離心10分鐘，取上清置于冰上待測(cè)。若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃保存(可保存3天)。

3、血液處理

血漿:將收集的抗凝血于4℃，600g離心 10分鐘，吸取上層血漿到另一支試管中，加入等體積的試劑一，沸水浴 5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后12000g，4℃離心 10分鐘，將上清移入新的試管中放置于 4℃C待測(cè)，若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃℃保存(可保存3天)。

血細(xì)胞:將收集的抗凝血于4℃，600g離心10分鐘，棄去上層血漿用3倍體積的PBS清洗3次(用PBS重懸血細(xì)胞，600g離心 10分鐘)，加入等體積試劑一，沸水浴5min(纏封口膜，防止爆蓋)。之后12000g，4℃離心 10分鐘，吸取上清放于49℃待測(cè)，若暫時(shí)不能完成測(cè)試可放于-80℃℃保存(可保存3天)。

二、測(cè)定步驟

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至412nm，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零。

2、標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備:吸取 10mg'mL 標(biāo)準(zhǔn)溶液,用蒸餾水稀釋至 300pg/mL、200ug/mL、100pg/mL、50ug/mL、25ug/mL。

注意事項(xiàng):

1、若不確定樣本中 GSH含量的高低，可稀釋幾個(gè)梯度后再進(jìn)行測(cè)量。

2、因?yàn)樵噭┮恢泻械鞍踪|(zhì)沉淀劑，因此上清液不能月于蛋白濃度測(cè)定。如需測(cè)定蛋白含量，需另取組織。

3、如果測(cè)定吸光值超過(guò)線性范圍吸光值，可以增加樣不量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。

還原gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒 細(xì)胞凋亡

產(chǎn)品訂購(gòu)信息

BC9953 還原型gu胱甘肽(GSH)含量檢測(cè)試劑盒Reduced Glutathione(GSH) Content Assay Kit 100T/96S