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葉綠體蛋白提取試劑盒 常備現(xiàn)貨
產(chǎn)品貨號:P5057
產(chǎn)品名稱:葉綠體蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品簡介:
中文名稱:葉綠體蛋白提取試劑盒
規(guī)格:100T ; 50T
儲存條件:2-8℃,1 year
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyder P5057 葉綠體蛋白提取試劑盒
葉綠體是植物細(xì)胞所te有的能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器,光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的,由于具有這一重要功能,所以葉綠體一直是細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究對象。葉綠體蛋白提取試劑盒用簡便快速的方法即可從各種植物樣本中快速提取得到葉綠體總蛋白。本試劑盒適用于提取新鮮植物樣本的葉綠體蛋白,用于凍存樣本的提取時(shí)由于凍存過程中大部分葉綠體會被破壞,葉綠體蛋白回收率較低。本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解葉綠體膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。本試劑盒提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gelshift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。
適用樣本:植物
注:
1. 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以 2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3. 試劑拆封后請盡快使用完。
產(chǎn)品簡介:
葉綠體是植物細(xì)胞所te有的能量轉(zhuǎn)換細(xì)胞器,光合作用就是在葉綠體中進(jìn)行的, 由于具有這一重要功能,所以葉綠體一直是細(xì)胞生物學(xué)、遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的重要研究對象。葉綠體蛋白提取試劑盒用簡便快速的方法即可從各種植物樣本中快速提取得到葉綠體總蛋白。
本試劑盒適用于提取新鮮植物樣本的葉綠體蛋白,用于凍存樣本的提取時(shí)由于凍存過程中大部分葉綠體會被破壞,葉綠體蛋白回收率較低。
本試劑盒含有的du特配方能夠有效溶解葉綠體膜組份。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物,阻止了蛋白酶對蛋白的降解,為提取高純度的蛋白提供了保證。
本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift 凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。
自備試劑和儀器:
離心機(jī)、振蕩器、渦旋混勻器、移液器、冰箱、冰盒,PBS緩沖液、蛋白定量試劑盒,離心管、吸頭、一次性手套
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、使用方便。
2、含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
3、紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
4、蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含 6 種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑,每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性。
使用方法:
一、使用注意事項(xiàng):
1. 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
2. 蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3. 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
4. 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。
5. 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完,蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
6. 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
二、操作步驟
1. 提取液準(zhǔn)備:
每200μl預(yù)冷的蛋白提取液C中加入1μl 蛋白酶抑制劑,混勻后置冰上備用。
2. 取200-500mg新鮮植物樣本葉片,洗凈擦干后去除葉梗和粗脈。用手術(shù)jian刀盡可能剪碎。
3. 加入1ml-2 ml試劑A,用勻漿機(jī)/組織攪碎機(jī)/勻漿器充分勻漿。
4. 將勻漿液用100μm 細(xì)胞篩過濾。
5. 將濾液在500×g條件下離心5分鐘,棄沉淀,收集上清。
6. 將上清在800×g條件下離心5分鐘,棄沉淀,收集上清。
7. 將上清3000×g離心15分鐘,棄上清,收集沉淀。
8. 將沉淀用1 ml試劑B重懸。
9. 將懸液3000×g離心15分鐘,棄上清,收集沉淀。
10. 在沉淀中加入200-300μl葉綠體蛋白提取液C,充分混勻。
11. 將蛋白提取液在4℃條件下振蕩20-45分鐘。
12. 在4℃,12000×g條件下離心 15 分鐘。
13. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即可得到葉綠體總蛋白。
14. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得優(yōu)良實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底, 避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并che底清除殘留清潔劑。
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