諾博萊德 Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒

Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 凝膠

產(chǎn)品貨號：P9108

產(chǎn)品名稱：Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：25T / 50T/ 100T

產(chǎn)品簡介：

英文名稱：Tris-Tricine-SDS-PAGE

中文名稱：Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒

規(guī)格：25T ; 50T ; 100T

儲存條件：2-8℃，avoid light，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介：

常規(guī)的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白，對于相對分子量小的，尤其是10 kD 以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產(chǎn)品包括Tricine-SDS- PAGE 凝膠制備所需全套試劑，只需自備蒸餾水，即可制備高質(zhì)量各種濃度的凝膠，方便、快捷，電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實(shí)驗(yàn)。

Tris-Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 凝膠

注意事項(xiàng)：

1、10%APS配制后分裝-20 度保存。APS溶液不穩(wěn)定，應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若發(fā)現(xiàn)凝膠聚合時(shí)間延長，應(yīng)考慮更換，使用-20 度保存的10%APS。

2、在凝膠配制過程中，尤其是液體混勻步驟，應(yīng)盡量避免氣泡的產(chǎn)生。

3、在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作，加水時(shí)速度不能太快。

4、丙烯酰胺具有神經(jīng)毒性，操作時(shí)請穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。

5、本產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體實(shí)驗(yàn)或人體治療。

I 配制分離膠

1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 6%C 、凝膠緩沖液和甘油加入到離心管中混合。

2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。

3、在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液（1 mm mini-gel，分離膠溶液加約 4 ml ），然后在分離膠溶液上輕輕 覆蓋一層 1-3 cm 的水層，使凝膠表面保持平整。

4、靜置，待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。

II 配制夾層膠

去除覆蓋在分離膠上的水層，用濾紙將殘留的水盡量吸去。

1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。

2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。

3、將適量的夾層膠溶液迅速加至分離膠的上面（對于 1 mm 的 mini-gel，夾層膠溶液加約 1 ml ）， 然后在夾層膠溶液上輕輕覆蓋一層水層，使凝膠表面保持平整。

4、靜置，待夾層膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。

III 配制濃縮膠

去除覆蓋在夾層膠上的水層，用濾紙將殘留的水吸去。

1、將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C 和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。

2、加入 10% PAGE 膠凝固劑和 PAGE 膠促凝劑，立即渦旋混勻 5-10 秒，以使溶液充分混勻。

3、將梳子插入凝膠內(nèi)，避免產(chǎn)生氣泡。

4、待凝膠聚合后，小心地拔出梳子，以免破壞加樣孔。

5、進(jìn)行電泳操作。

IV 電泳

將電泳槽放入 4℃或冰水浴中，外槽加入陽極緩沖液，內(nèi)槽加入陰極緩沖液，30V 預(yù)電泳 10min， 將樣品（已經(jīng)過 Tricine 專用上樣緩沖液處理）加入點(diǎn)樣孔后 30V 電泳 1 小時(shí)，100V 電泳至溴酚藍(lán)到達(dá)膠底 部后停止電泳，進(jìn)行后續(xù)的考馬斯亮藍(lán)染色或電轉(zhuǎn)。

產(chǎn)品訂購信息：

NobleRyder  P9108  Tris-Tricine-SDS-PAGE 凝膠制備試劑盒  25T / 50T/ 100T