產(chǎn)品分類(lèi)
Product Category諾博萊德 全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))樣本裂解
NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
產(chǎn)品貨號(hào):BC1598
產(chǎn)品名稱(chēng):全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
產(chǎn)品規(guī)格:50T / 100T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
中文名稱(chēng):全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))
規(guī)格:50T ; 100T
儲(chǔ)存條件:-20℃,avoid light,at least 1 year
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyder BC1598 全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))產(chǎn)品介紹:
全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))用于哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取總蛋白,試劑盒中的裂解液含有蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑,作用較為強(qiáng)烈,可快速獲得總蛋白,可用于免疫印跡實(shí)驗(yàn)等基礎(chǔ)研究實(shí)驗(yàn),由于含有上述的酶抑制劑,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。本品僅用于科研。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱(chēng) | 規(guī)格 | 儲(chǔ)存條件 |
裂解液(強(qiáng)) | 100mL | 2-8℃ |
磷酸酶抑制劑(100×) | 1mL | -20℃ |
蛋白酶抑制劑(100×) | 1mL | |
PMSF(100×) | 1mL |
操作方法:
1、組織總蛋白的提取
1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制劑、蛋白酶抑制劑和PMSF;混勻,放置在冰上備用;
2)稱(chēng)取0.1g的新鮮組織,放置于玻璃勻漿器的入口緩沖處,用眼科剪將組織塊盡可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至沒(méi)有明顯的組織塊,這個(gè)過(guò)程注意冰上操作;
3)將組織勻漿液移入1.5ml的EP管中,4 ℃ 12000g離心30min;
4)吸取上清至新的管中;
5)進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 ℃,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
2、細(xì)胞總蛋白的提取
1)裂解液的用量:107個(gè)細(xì)胞需要裂解液1ml;
2)貼壁細(xì)胞:棄去培養(yǎng)基,用冷的PBS洗兩次,棄去PBS,然后加入計(jì)算好的細(xì)胞裂解液;在冰上用細(xì)胞刮刀進(jìn)行刮離細(xì)胞,
將刮離的細(xì)胞裂解液移入EP管中,顛倒裂解20-30min
3)懸浮細(xì)胞:4 ℃ 400g離心收集細(xì)胞,用冷的PBS洗兩次細(xì)胞,同樣按細(xì)胞數(shù)加入裂解液,
渦旋10s,放置冰上裂解10min,重復(fù)3-4次;
4)裂解完畢之后,將細(xì)胞裂解液4 ℃ 12000g離心30min;
5)將上清移入新的EP管中;進(jìn)行蛋白定量或者變性進(jìn)行蛋白實(shí)驗(yàn)。
(提取好的蛋白建議保存于-80 ℃,即用即取,避免反復(fù)凍融,避免長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。)
注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)過(guò)程,所有試劑都要需要預(yù)冷或者即融,保證操作過(guò)程中的低溫環(huán)境;
PSMF(有毒)現(xiàn)用現(xiàn)加,因?yàn)镻MSF在水溶液中會(huì)快速降解;
全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))樣本裂解
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
BC1598 全蛋白提取試劑盒(強(qiáng))50T / 100T
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