銅藍(lán)蛋白(Ceruloplasmin，Cp)測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)

微量法 100T/48S

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定測(cè)定意義：

銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白，有運(yùn)輸銅的功能，同時(shí)具有氧化酶的活性，是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。

測(cè)定原理：

銅藍(lán)蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物，在 645nm 處有特征吸收峰，依此可得銅藍(lán)蛋白活性。

銅藍(lán)蛋白測(cè)定試劑盒 抗氧系列-常備現(xiàn)貨

組成：

試劑三：液體 15ml×1 瓶，4℃避光保存。（使用前 37℃預(yù)熱）

自備儀器和用品：

天平、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。

測(cè)定操作表

1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 645nm，蒸餾水調(diào)零。

2、操作表

計(jì)算公式:

a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、按體積計(jì)算

酶活定義:37℃條件下， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高 0.01 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/ml）=ΔA×V 反總÷0.01÷V 樣÷T = 33.33×ΔA 2、按鮮重計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高 0.01 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/g 鮮重）=ΔA×V 反總÷0.01÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T = 33.33×ΔA÷W 3、按蛋白濃度計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高 0.01 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/ mg prot）=ΔA×V 反總÷0.01÷（Cpr×V 樣）÷T = 33.33×ΔA÷Cpr

V 樣：0.03 ml；V 反總：0.3 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；V 樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g

b. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

1、按體積計(jì)算

酶活定義:37℃條件下， 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高 0.005 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/ml）=ΔA×V 反總÷0.005÷V 樣÷T = 66.66×ΔA

2、按鮮重計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高 0.005 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/g 鮮重）=ΔA×V 反總÷0.005÷（W×V 樣÷V 樣總）÷T = 66.66×ΔA÷W 3、按蛋白濃度計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高 0.005 為一個(gè)酶活單位。

Cp 活力（U/ mg prot）=ΔA×V 反總÷0.005÷（Cpr×V 樣）÷T = 66.66×ΔA÷Cpr

V 樣：0.03 ml；V 反總：0.3 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；V 樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng):

試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。

銅藍(lán)蛋白測(cè)定試劑盒 抗氧系列-常備現(xiàn)貨